これに対し、清朝はアヘン密輸の取締官として林則徐を任命します。
マカオにも視察に入った林則徐は商人たちにアヘンを今後持ち込まない旨の誓約書を出させる一方、1839年、イギリス商人が持っていたアヘンを没収して廃棄しました。
誓約書を出して貿易を継続する商人もいましたが、イギリス側はその動きを阻止。強行に禁輸の解除を清朝に要望しますが、林則徐はこれをはねのけました。

こうして1840年にアヘン戦争が起き、イギリス艦隊の圧勝で戦争は終結、イギリスは香港を手に入れます。
天然の良港を持つ香港に対して、珠江の土砂堆積で港湾機能が低下したマカオ。当時のイギリスの国力も後押しして、香港は国際貿易拠点として急成長しますが、逆にマカオの地位は相対的に下がっていきました。
さらに列強各国の植民地化の動きがマカオにも襲いかかります。

1849年、ポルトガルは長年続いていたマカオの地代支払いを停止。
1887年には清朝とポルトガルによる通商条約で、マカオの永久統治が合意。マカオは正式にポルトガルの植民地となったのでした。
さて、香港に主役の座を譲った後のマカオは、西欧列強の外交官や商人の社交場やリゾート地としての様相を呈していきます。収益基盤として賭博が合法化されたのもこの頃。